Diagnosticul dirofilariozei la caini si pisici - partea a doua

4.Teste ELISA si teste IMUNOCROMATOGRAFICE HEARTWORM IC

           Exista numeroase teste ELISA si teste rapide imunocromatografice ce se comercializeaza. Acestea permit detectarea antigenului determinat de femela adulta de dirofilarie in sangele de caine si pisica.Testele rapide imunocromatografice sunt ieftine si se pot face la un singur individ pe cand, placile ELISA se pot realiza mai multe probe pe aceeasi placuta.Aceste teste se pot folosi pentru verificare eficacitatii tratamentului. Exista multi factori care pot afecta sensibilitatea testelor.Trebuie sa se tina cont ca la pisici antigenemia poata fi detectata abia dupa 5-8 luni.

Test rapid imunocromatografic Heartworm IC

Testul rapid Heartworm IC este produs de BIOPRONIX divizia de diagnostic a AGROLABO, Italia si este comercializat in Romania de catre CYF MEDICAL DIVISION SRL http://www.cyf-medical-distribution.ro

Toate probele trebuie aduse la temperatura camerei înainte de testare. Probele ce au fost depozitate sau congelate în prealabil se vor centrifuga înainte de testare. Serul sau plasma proaspete, sau care au fost refrigerate la temperaturi de 2°-7°C timp de maximum 5 zile, pot fi folosite. Dacă sunt pastrate mai mult timp, probele ar trebui congelate. De asemenea, se poate folosi şi sânge recoltat pe anticoagulant (EDTA, heparină etc.). Sângele poate fi folosit proaspăt sau păstrat la frigider timp de maximum 5 zile. Sângele hemolizat poate afecta rezultatul testului.

Modul de utilizare este cat se poate de simplu si este explicat in urmatoarele randuri.

1. Recoltati o proba de sange.

2.      Folosind pipeta de unica folosinta prevazuta in set, adaugati o picatura de sange integral, ser sau plasma in dreptul ferestrei ”S”.

3.      Adaugati o picatura din tubul cu solutie tampon in aceeasi fereastra ”S”.

4.      Citiţi rezultatul dupa aproximativ 10 minute. Nu asteptati 20 de minute.

5.      Interpretarea rezultatelor: Rezultat pozitiv: prezenta unei a doua linii in ferestra “T” (in cazul unui raspuns negativ, apare o singura linie in dreptul ferestrei “C”).

Principiul testului . HEARTWORM IC este un test rapid ce foloseşte tehnica imunocromatografică de tip sandwich, folosind anticorpi împotriva antigenului Dirofilaria immitis. Un set de anticorpi monoclonali conjugaţi cu particule de aur coloidal, impreună cu un alt set de anticorpi monoclonali sunt imobilizaţi în interiorul membranei. Atunci când o probă provenită de la un pacient conţine Dirofilaria immitis, moleculele respective se vor cupla cu anticorpii înveliţi cu particule de aur coloidal, formând un complex antigen-anticorp. Acesta va migra de-a lungul membranei şi va fi captat de al doilea set de anticorpi monoclonali ce a fost imobilizat la nivelul membranei din dreptul ferestrei “T”, formând o linie de culoare roşie. Celălalt set de anticorpi a fost imobilizat în dreptul ferestrei “C”. Aceştia se vor cupla cu lichidul ce continuă sa migreze, formând o a doua linie (linia de control) care ne asigură ca testul a fost executat corect. Acestă linie ar trebui să apară indiferent daca proba este pozitivă sau negativă.

Interpretarea rezultatelor. Rezultatul pozitiv poate fi observat chiar şi într-un minut, în funcţie de severitatea infectiei.

Rezultat negativ: Testul este considerat negativ dacă apare o singură linie în dreptul ferestrei “C” (linia internă de control).

Rezultat pozitiv: Testul este pozitiv atunci când apar două linii colorate. Una va fi în dreptul ferestrei “T” (linia de testare), iar cealaltă în dreptul ferestrei “C” (linia de control). Orice linie colorata ce apare în ferestra “T” ar trebui considerată drept răspuns pozitiv.

               Avantanje: simplu de efectuat, citirea rezultatului in maxim 15 minute de la recoltarea probei, foarte specifice si sensibilie, practic rezultatul pozitiv in urma efectuarii unui test confirma clar infectia cu D. Immits; testele rapide foarte ieftine; diagnostic atat la caine cat si la pisica

  Dezavantaje: detecteaza numai infectile cu D. Immitis

5.Teste pentru detectarea anticorpilor

            Aceste teste se folosesc numai pentru diagnosticul dirofilariozei la pisici.Testele pentru depistarea anticorpilor au avantajul ca pot stabili felul infectiei(masculi/femele, adulti/larve) cel mai devreme 2 luni post infectie. Cu toate acestea interpretarea rezultatelor se complica pentru ca rezultate pozitive se pot intalni atat in infectii nereusite (dezvoltarea larvelor este intrerupta de raspunsul imun) cat si in cele evidente.

Avantanje: foarte sensibil, capabil sa depisteze infectia pisici cu dirofilaria immitis; Dezavantaje: costisitor; nufoarte specific, greu de interpreta rezultatele

6.PCR (Polymerasechaina reaction)

            PCR sau reactia in lant a polimerazei este o metoda cu o sensibilitate maxima, fiind capabila de diferentiere a tipurilor de microfilarii. Se recomanda pentru diferentierea filarilor,  in cazul aparitiei anomaliilor mirfologice ale microfilarilor (anomalii aparute in tratamentrul preventiv necorespunzator sau in cazul infectilor multiple cu diferite tipuri de dirofilarii).

            Avantanje: foarte sensibil, specific, capabil sa diferentieze specile de filarii

            Dezavantaje: costisitor, numai in laboratoarele specializate cu medici instruiti

7.Radiografii toracice

Radiografiile toracice pot arata stadiul avansat al infectiei, marirea in volum a arterelor pulmonare, patii pulmonare si in cele mai rele cazuri cardiomegalie dreapta.

Radiografie toracala a unuu caine in varsta de 3 ani, marirea in volum a arterei pulmonare craniale. De la acest caine s-au extras 53 de viermi adulti in urma unei interventii chirurgicale.

Claudio Genchi, Laura Rinaldi, Giuseppe Cringoli

8.Ecocardiografie

            Ecocardiografia permite o vizualizare a camerelor cardiace si a vaselor cardiace.De asemenea permite vizualizarea parazitilor in ventriculul drept, vena cava, artera pulmonara sau in partea proximala a arterelor pulmonare caudale, precum si marirea in volum a cordului drept. Dirofilaria immitis se observa ca doua linii paralele plutitoare in ventriculul drept.

   Electrectrocardiograma a aceluiasi caine ca si in poza de la examenul radiologic. Dirofilarile se prezinta ca sageti paralele in lumenul arterei pulmonare drepte.

Claudio Genchi, Laura Rinaldi, Giuseppe Cringoli

              Ultrasonografia se poate folosi ca metoda de diagnostic si tratament chirurgical prin indepartarea stadilor adulte.  Murat Sarierler si Bulent Ulutas, de  la Universitatea Adnan Menderes, Turcia intr-o cercetare au incercat indepartarea dirofilarilor din cordul unui caine. . Anstezia s-a realizat cu Xilazina si ketamina combinate cu administrarea subcutanta de atropina.

Cainele a fost pozitionat pe partea laterala. Regiunea venei jugulare dreapta a fost pregatita pentru operatie aseptica. De asemenea spatiul intercostal 5-7 a fost ras si apoi aplicat gel pentru examinarea ultrasonografica. Ca urmare a inciziei veneijuculare drepte, pensele forceps flexibile au fost introduse in jugulara. Sub ghidajul ultrasonografiei, dirofilarile au fost inlaturate. Insertia s-a repetat pentru eliminare tutoror dirofilarilor posibile.S-au extras 17 dirofilarii adulte. O zi dupa interventia chirurgicala cainele a murit din cauza conditiei clinice precare. La exameul necropsic efectuat imediat s-au mai gasit alti 34 de viermi la cavitatea drepta a inimii si artera pulmonara.

Concluzile l-a care au ajuns au fost ca procentul de eliminare a dirofilarilor a fost de 33.3%  si ca este posibil eliminarea viermilor adulti din partea dreapta a inimii cu ajutorul utrasonografiei.

9.Necropsia

            La examenul necropsic formele adulte de D.immitis s-au gasit in multiple parti ale corpului: testicule, spatiu epidural, aorta abdominala si ramurile ei, ficat, sacul pericardic, arterele cerebrale, ventriculele laterale, spatiu subarahnoidian, insa de cele mai multe ori se gasesc sa intalnesc la nivel pulmonar si cardiac.

Original-Std.  Florin Gustere, Dr. Dragos Cobzariul; poze efectuate in cadrul Clinicii de Boli Infectioase , Facultatea de Medicina Veterinara, Bucuresti, 2009

Original-Std.  Florin Gustere, Dr. Dragos Cobzariul; poze efectuate in cadrul Clinicii de Boli Infectioase , Facultatea de Medicina Veterinara, Bucuresti, 2009